Пептон ферментативный регистрационное удостоверение. Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей

25.12.2020

ГОСТ 13805-76

Издание официальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ

УДК 547.984.3: 006.354 Группа Н18

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ПЕПТОН СУХОЙ ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ

Технические условия

Dry fermentation pepton for bacteriological obgects. Technical conditions

ГОСТ 13805-68

Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 29 апреля 1976 г. № 1002 срок действия установлен

с 01.01- 1977 г. до 01.01. 1982 г.

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на ферментативный пептон для бактериологических целей, получаемый из рубцов и летошки крупного рогатого скота, овец и коз, а также из желудков свиней с использованием слизистой оболочки желудков и поджелудочной железы.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

1.1. Ферментативный пептон для бактериологических целей должен изготавливаться в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическим правилам, утвержденным в установленном порядке.

1.2. Ферментативный пептон для бактериологических целей по физико-химическим и биологическим показателям должен соответствовать требованиям и нормам, указанным в табл. 1.

Таблица 1

Издание официальное Перепечатка воспрещена

Переиздание Апрель 1980 г.

Продолжение табъ. 1

2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ

2.1. Ферментативный пептон для бактериологических целей принимают сериями. Под серией следует понимать количество пептона, изготовленное из одноименного вида сырья за один технологический цикл, получившее свой номер и оформленное одним документом о качестве.

2.2. Для контроля качества ферментативного пептона от каждой серии препарата отбирают выборку в размере:

от серии до 100 единиц фасовки - 3%;

от серии свыше 100 единиц фасовки- 1%.

2.3. Выборку отбирают из единиц фасовки, взятых из разных мест серии.

2.4. При неудовлетворительных результатах испытаний хотя бы по одному показателю по нему проводят повторные испытания на удвоенном количестве проб, отобранных от той же серии пептона.

Результаты испытаний распространяются на всю серию.

3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЯ

3.1. Метод отбора проб

3.1. L Содержимое отобранных единиц фасовки тщательно перемешивают и отбирают общую пробу массой не более 500 г.

Из общей пробы ферментативного пептона выделяют четыре пробы для анализа массой не менее 100 г каждая. Отобранные пробы помещают в чистые сухие банки с притертыми пробками. Пробки заливают парафином или смолой.

3.1.2. На банки с пробами ферментативного пептона наклеивают этикетки с указанием;

наименования препарата;

даты изготовления;

номера серии;

даты взятия пробы;

обозначение настоящего стандарта.

Две пробы используют для анализа, а две - оставляют в архиве государственного контролера в течение 4 лет.

3.2. Внешний вид, цвет и запах пептона определяют органолептически.

3.3. Определение концентрации водородных ионов (pH)

3.3.1. Аппаратура и реактивы

РН-метр;

весы лабораторные;

колбу стеклянную по ГОСТ 1770-74;

дилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74;

фильтры бумажные;

3.3.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0,02 г, помещают в колбу и растворяют в 99 мл прокипяченной и охлажденной дистиллированной воды. В растворе допускается незначительный осадок, который отфильтровывают через бумажный фильтр. В прозрачном фильтрате 1%-ного раствора пептона определяют концентрацию водородных ионов (pH) в соответствии с правилами, прилагаемыми к рН-метру.

3.4. Определение содержания нерастворимых примесей

3.4.1. Аппаратура, материалы и реактивы Для проведения испытания применяют: весы аналитические; шкаф сушильный на 105°С;

стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70; эксикатор по ГОСТ 6371-73;

цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74;

пробки ватно-марлевые;

фильтры бумажные;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77, 0,1 н. раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

3.4.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в колбу, добавляют 95 мл дистиллированной воды и тщательно перемешивают, добиваясь максимального растворения пептона. Приготовленный 5%-ный раствор пептона фильтруют через бумажный фильтр, предварительно высушенный в бюксе до постоянной массы и взвешенный с погрешностью не более 0,0002 г. По окончании фильтрования раствора пептона фильтр промывают 50 мл дистиллированной воды, помещают в бюксу и высушивают до постоянной массы при 105°С. Первое взвешивание производят после высушивания фильтра в течение 3 ч, последующие взвешивания - после 30 мин высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0,0002 г.

Профильтрованный раствор 5%-ного пептона разбавляют в 5 раз дистиллированной водой. Полученный 1%-ный раствор пептона доводят 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до pH 7,7 и кипятят в течение 5 мин. Раствор должен остаться прозрачным, без образования осадка.

После кипячения 1%-ный раствор пептона разливают в пробирки по 7-8 мл, закрывают ватными пробками и выдерживают в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПа. Раствор должен остаться прозрачным, без образования осадка.

3.4.3. Обработка результатов

Х= (т 2-nil) *41010

где пг - масса пептона, взятая для приготовления 100 г 5%-ного раствора пептона, г;

тп х - масса бюксы с фильтром до фильтрования, г; т 2 - масса бюксы и фильтра с осадком после высушивания, г.

3.5. Определение содержания влаги

3.5.1. Аппаратура

Для проведения испытания применяют;

весы аналитические;

шкаф сушильный лабораторный на 105°С;

стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70;

эксикатор по ГОСТ 6371-73.

3.5.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1,5-2,0 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в бюксу, предварительно высушенную до постоянной массы. Бюксу с навеской помещают в сушильный шкаф и сушат до постоянной массы при 105°С.

Первое взвешивание производят через 1 ч, последующие - через 30 мин высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0,0002 г.

3.5.3. Обработка результатов

у (ш-Л1\) * 1ЮО

где m - масса навески пептона до высушивания, г; гп\ - масса навески пептона после высушивания, г.

3.6. Определение содержания сульфированной золы

3.6. L Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют: весы аналитические; элемент нагрева (плитку, горелку); печь муфельную;

кислоту серную по ГОСТ 4204-77, концентрированную.

3.6.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1,0-1,5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в тигель, предварительно прокаленный до постоянной массы. В тигель с навеской пептона добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты и осторожно нагревают смесь на плитке до удаления избытка серной кислоты, после чего тигель переносят в муфельную печь и продолжают озоление при температуре 500-600°С до постоянной массы золы.

3.6.3. Обработка результатов

у _ тп\ */110(0

где тп - масса пептона до прокаливания, г; т х - масса золы после прокаливания, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%.

3.7. Определение содержания истинного пептона

3.7Л. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

пипетки вместимостью 1 и 5 мл;

воронки стеклянные;

фильтры бумажные:

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77, 10%-ный раствор; медь сернокислую по ГОСТ 4165-78, 2%-ный раствор; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

3.7.2. Подготовка к испытанию Построение градуировочного графика

По оси абсцисс откладывают концентрацию истинного пептона в растворе, по оси ординат - величину оптической плотности (Е) этого раствора согласно данным, приведенным в табл. 2. Приведенные в табл. 2 величины оптической плотности (Я) получены измерением на фотоэлектроколориметре при длине волны 540 нм растворов специально приготовленной серии пептона, содержащей минимум свободного белка и аминокислот и максимум пептидов.

Концентрация истинного пептона в растворе, %

Таблица 2

Оптическая плотность (Я) раствора

о,дао

3.7.3. Проведение испытания

Истинный пептон определяют в 0,5%-ном растворе испытуемого пептона. Для этого 5%-ный раствор пептона, приготовленный в соответствии с п. 3.4.2, разбавляют водой в 10 раз (0,5 мл 5%-ного раствора пептона и 4,5 мл дистиллированной воды).

В пробирку, содержащую 5 мл 0,5%-ного раствора испытуемого пептона, добавляют 0,5 мл 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 0,5 мл 2%-ного раствора сернокислой меди. Одновременно ставят контроль, для чего в пробирку наливают 5 мл воды,

0,5 мл 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 0,5 мл 2%-ного раствора сернокислой меди.

Смесь в пробирках хорошо перемешивают и через 2 мин фильтруют через бумажные фильтры. Интенсивность окраски измеряют на фотоэдектроколориметре при длине волн 540-560 нм или на спектрофотометре при длине волны 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм. Концентрацию истинного пептона в пробе определяют по градуировочному графику.

3.7.4. Обработка результатов

V _ Л М1КЗО Аз 05

0,5-масса пептона (препарата), содержащаяся в 100 г 0,5%-ного раствора, г.

3.8. Определение содержания общего азота Содержание общего азота определяют методом Къельдаля или методом Къельдаля в сочетании с изотермической отгонкой в чашках Конвея.

3.8.1. Определение содержания общего азота методом Къельдаля

3.8.1.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют: весы аналитические;

колбы Къельдаля вместимостью 50-100 мл по ГОСТ

аппарат для отгонки аммиака; пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл;

бюретки вместимостью 25 или 50 мл с ценой деления 0,05 мл; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72; кислоту серную по ГОСТ 4204-77, концентрированную и 0,1 н. раствор;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77, 30-33%-ный и 0,1 н. растворы, приготовленные на предварительно прокипяченной дистиллированной воде;

водорода перекись по ГОСТ 10929-76; метиловый красный по ГОСТ 5853-51; метиловую синь;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67;

метиловый оранжевый по ГОСТ 10816-64, 0,1% -ный раствор.

3.8.1.2. Проведение испытания

В колбу К"ьельдаля помещают 1 мл 5%-ного раствора пептона и прибавляют 2 мл концентрированной серной кислоты. В горлышко колбы вставляют стеклянный грушевидный баллончик или небольшую воронку с запаянным кончиком и минерализуют пробу сначала на слабом огне, затем степень нагрева усиливают, не допуская выбрасывания кипящей смеси в узкую часть колбы. Минерализацию проводят в присутствии катализатора перекиси водорода. Катализатор добавляют после начала кипения по 0,5 мл через каждые 15-20 мин до полного обесцвечивания раствора.

После охлаждения содержимое колбы переносят с 10-12 мл дистиллированной воды в колбу для отгона. Полноту переноса проверяют по индикатору метиловому оранжевому. Последняя порция смывных вод должна остаться желтой.

В приемную колбу аппарата К"ьельдаля наливают 20 мл 0,1 н. раствора серной кислоты и 2 капли индикатора Таширо. Индикатор Тащиро готовят путем растворения 0,4 г метилового красного и 0,2 г метиловой сини в 200 мл 96%-ного этилового спирта.

Отгонную колбу подсоединяют к холодильнику и парообразователю. Содержимое отгонной колбы нейтрализуют по индикатору метиловому оранжевому 30-33%-ным раствором гидрата окиси натрия. Отгон проводят до тех пор, пока в приемной колбе соберется около 70 мл раствора.

Содержимое приемной колбы титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до перехода окраски раствора от фиолетовой к зеленой. Одновременно ставят контрольный опыт на реактивы, для чего вместо раствора пептона в колбу для минерализации берут 1 мл дистиллированной воды.

3.8.1.3. Обработка результатов

V _ (VK-ViKi) ■ 0,0014* 100 4 ~ 0.05

где V-количество 0,1 н. раствора серной кислоты, налитое в приемную колбу, мл;

К-поправочный коэффициент к титру 0,1 н. серной кислоты;

Vi - количество ОД н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой или контрольной пробы, мл;

К\ - поправочный коэффициент к титру ОД н. раствора гидрата окиси натрия;

*0,05- масса пептона, содержащаяся в 1 мл 5%-ного раствора, взятого на анализ, г;

0,0014 - количество азота, эквивалентное 1 мл 0,1 н. раствора серной кислоты, г.

За окончательный результат испытания принимают разность между средними арифметическими результатов двух параллельных определений в опытных и контрольных пробах. Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений не должны превышать 0,2%.

3.8.2. Определение содержания общего азота методом Кьельда-ля в сочетании с изотермической отгонкой в чашках Конвея

3.8.2.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют: микробюретки;

пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл; чашки Конвея;

колбы Кьельдаля вместимостью 50-100 мл по ГОСТ

мерные колбы вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74;

вазелин по ГОСТ 5774-76;

водорода перекись по ГОСТ 10929-76;

метиловый красный по ГОСТ 5853-51;

метиленовую синь;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67; кислоту серную ГОСТ 4204-77, концентрированную и 0,025 н. раствор;

натрия гидрат окиси (натр едкий) по ГОСТ 4328-77, 40%-ный и 0,025 н. растворы;

дистиллированную воду по ГОСТ 6709-72.

3.8.2.2. Подготовка к испытанию Приготовление индикатора Таширо по п. 3.8.1.2.

3.8.2.3. Проведение испытания

5 мл 5%-ного раствора пептона минерализуют с подогревом в колбе Кьельдаля с 10 мл серной кислоты (концентрированной) до получения бесцветного раствора. В качестве катализатора используют 0,5 мл пергидроля. После минерализации образец переносят количественно в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки дистиллированной водой. Во внутреннюю часть чашки Конвея наливают точно 2 мл 0,025 н. раствора серной кислоты. Чтобы используемая жидкость не растекалась, чашку устанавливают наклонно. Затем закрывают крышкой, смазанной вазелином, оставляя небольшую щель, через которую пипеткой вносят в наружную часть чашки 1 мл испытуемого раствора после минерализации. Передвигают чашку так, чтобы осталась щель шириной 5-6 мм с противоположной стороны и через нее быстро вливают 4 мл раствора 40%-ной щелочи. Чашку плотно закрывают крышкой, осторожно перемешивают круговыми движениями содержимое и оставляют на 15-18 ч. Несвязанный с аммиаком избыток кислоты

оттитровывают 0,025 н. раствором едкого натра по индикатору Таширо. Параллельно ставят контрольную пробу, для чего во внешнюю часть чашки Конвея помещают вместо испытуемого раствора дистиллированную воду.

3.8.2.4. Обработка результатов

v 0,G0035(V-V\)K* 100 * 100* КЮ ^5--- ’

где V - количество 0,025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование контрольной пробы, мл;

V x - количество 0,025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл;

К- поправочный коэффициент к титру 0,025 н. раствора едкого натра;

0,00035-количество азота, эквивалентное 1 мл 0,025 н. раствора едкого натра, г;

5-масса пептона, взятая для получения 5%-ного раствора, г;

5 - количество препарата, взятое для минерализации, мл; 1 -количество испытуемого раствора, мл.

3.9. Определение содержания азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов

3.9. L Аппаратура и реактивы

стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-72; пипетки вместимостью 1, 2 и 20 мл;

бюретки вместимостью 5 и 10 мл с ценой деления 0,05 мл; формалин технический по ГОСТ 1625-75; натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77, 0,1 н. раствор; кислоту серную по ГОСТ 4204-77, 0,1 н. раствор; фенолфталеин по ГОСТ 5850-72, 1%-ный спиртовый раствор; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

3.9.2. Подготовка к испытанию

Непосредственно перед работой готовят формольную смесь. Для этого к 50 мл формалина добавляют 1 мл 1%-ного раствора фенолфталеина и 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия доводят окраску смеси до слабо-розовой.

3.9.3. Проведение испытания

К 2 мл прозрачного 5%-ного раствора пептона, приготовленного в соответствии с п. 3.4.2, приливают 18 мл дистиллированной воды и доводят pH смеси до 7,0 потенциометрически 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия или серной кислоты. Затем приливают 2 мл формольной смеси и при постоянном перемешивании потенциометрически титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси нат-трия до pH 9,2.

Одновременно ставят контроль на реактивы, для чего вместо 2 мл 5%-ного пептона берут 2 мл дистиллированной воды.

3.9.4. Обработка результатов

у _ (V- VQK-0WM-100

где V-количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл;

V\ - количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование контрольной пробы, мл;

К - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия;

0,0014 - количество азота, эквивалентное 1 мл 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, г;

0,1-масса пептона, содержащаяся в 2 мл 5%-ного пептона, г.

3.10. Определение содержания свободного б е л-к а

3.10.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

фотоэлектроколориметр;

пипетки вместимостью 5 и 10 мл;

пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-75;

кислоту трихлоруксусную 20%-ный раствор.

3.10.2. Проведение испытания

К 5 мл фильтрата 5%-ного раствора пептона, приготовленного в соответствии с п. 3.4.2, добавляют 5 мл 20%-ного раствора три-хлоруксусной кислоты и хорошо перемешивают. Через 5 мин определяют оптическую плотность смеси на фотоэлектроколориметре при длине волны 630 нм (красный светофильтр) в кюветах с рабочей длиной 10 мм против того же раствора пептона, разведенного 1: 1 дистиллированной водой.

3.10.3. Обработка результатов

3.11. Определение содержания хлоридов

3.11.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г; элемент нагрева (горелку, плитку); пипетки вместимостью 1, 2, 10, 20 и 25 мл; бюретки вместимостью 25 мл с ценой деления 0,05 мл; стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-72; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72; серебро азотнокислое по ГОСТ 1277-75, 0,1 н. раствор; квасцы железоаммониевые по ГОСТ 4205-77, насыщенный раствор;

калий роданистый по ГОСТ 4239-77 или аммоний роданистый по СТ СЭВ 222-75, 0,1 н. раствор;

кислоту азотную по ГОСТ 4461-77, концентрированную.

3.11.2. Проведение испытания

К 20 мл 1%-ного раствора пептона, приготовленного в соответствии с п. 3.4.2, добавляют 30 мл дистиллированной воды, 1 мл концентрированной азотной кислоты и 10 мл 0,1 и. раствора азотнокислого серебра. Раствор нагревают до начала кипения и быстро охлаждают путем погружения стакана с раствором в сосуд с водой комнатной температуры. После охлаждения смеси добавляют 2 мл насыщенного раствора железоаммониевых квасцов (индикатор) й титруют 0,1 н. раствором роданистого калия (или роданистого аммония) до появления кирпично-красного окрашивания.

3.11.3. Обработка результатов

Y (VK-ViKi) 0,003545- 100 7 02

где V-количество 0,1 н. раствора азотнокислого серебра, взятое в стакан с пробой, мл;

К- поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора азотнокислого серебра;

V x - количество 0,1 и. раствора роданистого калия или роданистого аммония, израсходованное на титрование пробы, мл;

К\ - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора роданистого калия или роданистого аммония;

0,003545-количество хлоридов (хлор-иона), эквивалентное 1 мл ОД н. раствора азотнокислого серебра, г;

0,2- масса пептона, содержащаяся в 20 мл 1%-ного раствора, г.

3.12. Определение солей тяжелых металлов

3.12.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г; элемент нагрева (плитку, горелку); печь муфельную;

тигли фарфоровые по ГОСТ 9147-73;

цилиндры мерные вместимостью 10 мл по ГОСТ 1770-74; кислоту серную по ГОСТ 4204-77, концентрированную; аммоний уксуснокислый по ГОСТ 3117-78, насыщенный раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72; кислоту уксусную по ГОСТ 61-75, 10%-ный раствор; натрий сернистый по ГОСТ 2053-77, насыщенный раствор; натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77, 10%-ный раствор; лакмус или универсальный индикатор.

3.12.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0,02 г, помещают в тигель, смачивают 2 мл концентрированной серной кислоты и осторожно озоляют сначала на плитке или горелке, а затем в муфельной печи при 500-600°С до получения однородной золы светло-серого цвета.

После охлаждения тигля золу заливают 1 мл насыщенного раствора уксуснокислого аммония и разводят 5 мл дистиллированной воды. Содержимое тигля фильтруют в цилиндр через бумажный фильтр. Тигель и фильтр промывают дистиллированной водой, доводя объем раствора в цилиндре до 10 мл.

Реакцию фильтрата в цилиндре доводят по лакмусу до нейтральной или слабокислой, добавляя по каплям 10%-ную уксусную кислоту или 10%-ный раствор гидрата окиси натрия. Затем прибавляют 1 мл 10%-ной уксусной кислоты, 5 капель насыщенного раствора сернистого натрия и перемешивают. Через 5 мин в растворе не должно быть осадка и желтого окрашивания раствора.

3.13. Определение наличия свободного индола

3.13.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют: пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-75; пипетки вместимостью 1, 2 и 10 мл; пробки резиновые конусные по ГОСТ 7852-76;

спирт амиловый;

калий азотистокислый по ГОСТ 4144-79, 0,1%-ный раствор; кислоту серную по ГОСТ 4202-75, концентрированную.

3.13.2. Проведение испытания

В пробирку с 10 мл 1%-ного раствора пептона прибавляют 2 мл амилового спирта, закрывают пробирку пробкой, хорошо взбалтывают и прибавляют 1 мл 0,1%-ного раствора азотистокислого калия и 1 мл концентрированной серной кислоты. Смесь осторожно перемешивают и дают отстояться.

В спиртовом слое не должно появляться розового окрашивания. Появление розового окрашивания спиртового слоя указывает на наличие в пептоне свободного индола.

3.14. Определение способности поддерживать рост микробов

3.14.1. Аппаратура, материалы и реактивы Для проведения испытания применяют:

весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г; рН-метр;

термостат на 37°С; автоклав;

фотоэлектроколориметр; пробирки по ГОСТ 10515-75; пробки ватно-марлевые; микропипетки вместимостью 0,2 мл; пипетки вместимостью 10 мл; бюретки вместимостью 25 или 50 мл; фильтры бумажные;

питательные среды (мясную воду по ГОСТ 20729-75); агар микробиологический по ГОСТ 17206-71 или другой микробиологический агар;

натрий хлористый по ГОСТ 4233-77.

3.14.2. Подготовка к испытанию

Готовят мясопептонный бульон (МПБ) в соответствии с требованиями ГОСТ 20730-75 и мясопептонный агар (МПА). Для приготовления МПБ к мясной воде добавляют 1% испытуемого пептона, 0,5% хлористого натрия и устанавливают pH среды 7,4.

Для приготовления МПА к мясной воде добавляют 1% испытуемого пептона 0,5% хлористого натрия, 2% микробиологического агара и устанавливают pH среды 7,4.

МПБ и МПА фильтруют, разливают по 8 мл в пробирки, закрывают ватномарлевыми пробками и пергаментными колпачками и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПа.

3.14.3. Проведение испытания

Пробирки со стерильными МПБ и косым МПА засевают суточными контрольными культурами. Посев каждой культуры производят микропипеткой по 0,2 мл в три пробирки с МПБ и МПА.

Инкубацию проводят 24 ч при 37-38°С.

Типичность роста суточных культур определяют на МПА визуально и под микроскопом. Рост должен быть типичным для каждого штампа микроорганизмов. Интенсивность роста оценивают в МПБ на фотоэлектроколориметре при длине волны 620-640 нм в кювете с рабочей длиной 5 мм.

4. ФАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ

И ХРАНЕНИЕ

4.1. Пептон фасуют массой нетто от 250 до 1000 г в жестяные банки по ГОСТ 5981-71 или, по соглашению с потребителем, массой нетто 30 кг в фанерные бочки по ГОСТ 5958-79 с прокладкой полиэтиленовой пленки по ГОСТ 10354-73. Жестяные банки герметически укупоривают.

4.2. На банку наклеивают этикетку с указанием: наименования предприятия* изготовителя; наименования препарата;

номера серии; массы нетто; условий хранения; срока годности;

4.3. Банки с пептоном упаковывают в дощатые неразборные ящики для консервов* по ГОСТ 13358-72 или в ящики из гофрированного картона для консервов и пищевых жидкостей по ГОСТ 13516-72.

4.4. Каждый ящик и бочку маркируют по ГОСТ 14192-77 с указанием дополнительных данных:

наименования предприятия-изготовителя;

наименования препарата;

номера серии;

даты изготовления;

массы брутто и нетто;

условий хранения;

срока годности;

обозначения настоящего стандарта.

На каждый ящик или бочку наносится предупредительный знак «Боится сырости».

4.5. Пептон хранят в сухом помещении при температуре не выше 30°С. Срок годности пептона в герметически закрытых банках 3 года, в фанерных бочках - 1 год со дня изготовления.

4.6. Пептон транспортируют всеми видами транспорта.

4.7. При нарушении герметизации тары пептон хранят в плотно закрытом сосуде или полиэтиленовом мешочке в сухом помещении при температуре от 0 до 8°С не более 1 месяца.

Изменение № 1 ГОСТ 13805-76 Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей. Технические условия

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 31Л2 81 Ай 5930 срок введения установлен

Под наименованием стандарта проставить код: ОКП 93 8881.

По всему тексту стандарта заменить единицу измерения: мл на см*.

Пункты 2.2, 2.3, 3.1.1. Заменить слова: «единиц фасовки» на «банок».

Пункт 2.2 дополнить словами: «от серии в бочках - каждую бочку».

Пункт 2.3. Заменить слова: «отбирают» на «составляют».

Пункт 2.4. Заменить слова: «от той же серин пептона» на «от той же вы* борки».

Пункт 3.1.1 дополнить словами: «При отборе проб из бочек отбирают пептон массой не менее 500 г. Выделение пробы для анализа производят, как опн* сано выше».

Пункты 3.4.1, 3.7.1, 3.8.1.1, 3.8.2.1, 3.9.1, 3,12,1. Заменить ссылку: ГОСТ 4328-66 на ГОСТ 4328-77.

Пункты 3.6.1, 3.8.1.1, 3.8.2.1, 3.9.1, 3.12.1. Заменить ссылку: ГОСТ 4204-66 яа ГОСТ 4204-77.

Пункты 3.7.1, 3.8.1.1, 3.8.2.1, 3.9.1, 3.10.3, 3.11.1, 3.13,1, 3.14.1 в части пипеток и бюреток дополнить ссылкой: «по ГОСТ 20292-74».

(Продолжение см. стр. 170J

Пункт 4.1 после слов «фанерные бочки» дополнить словами: «типа II»; заменить ссылку: ГОСТ 5958-70 на ГОСТ 5958-79.

Пункт 4.4. Заменить слова: «Каждый ящик и бочку маркируют по ГОСТ 14192-71 с указанием дополнительных данных» на «Транспортная маркировка по ГОСТ 14192-77 с указанием дополнительных данных»; «наименования предприятия-изготовителя» на «наименования предприятия-изготовителя и его то* варного знака»; «предупредительный» на «манипуляционный».

Пункт 4.6 дополнить словами: «с соблюдением правил перевозки грузов* действующих на данном виде транспорта.

Укрепление грузовых мест в транспортные пакеты при перевозке грузов железнодорожным транспортом по ГОСТ 21929-76 и ГОСТ 15901-70».

(ИУС № 3 1982 г.)

Изменение № 2 ГОСТ 13805-76 Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей. Технические условия

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 04.11.86 № 3382 срок введения установлен

Пункт 1.2. Таблица 1. Графа «Наименование показателя». Заменить слова: «Содержание свободного белка, оптическая плотность, не более» на «Наличие свободного белка, оптическая плотность, не более»; «Содержание солей тяжелых металлов» на «Наличие солей тяжелых металлов»; «Содержание» на «Массовая доля» (7 раз).

Пункты 3.4, 3.4.3, 3.5, 3.5.3, 3.6, 3.6.3, 3.7, 3.7.4, 3.8, 3.8.1, 3.8.1.3, 3.8.2, 3.8.2.4, 3.9, 3.9.4, 3.11, 3.11.3. Заменить слово: «содержанке» на «массовая доля».

Пункт 3.7.1 изложить в новой редакции:

(Продолжение см. с. 290)

«3.7.1, Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

фотоэлектроколориметр или спектрофотометр;

центрифуги настольные типа ОПн-8-У4,2,

пипетки вместимостью 1 и 5 см 3 по ГОСТ 20292-74;

пробирки стеклянные по ГОСТ 25336-82;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77, 10 %-ный раствор;

медь сернокислую по ГОСТ 4165-78, 2 %-ный раствор;

воду дистиллированную по TQCT 6709-72».

Пункт 3.7 3. Последний абзац изложить в новой редакции: «Смесь в пробирках хорошо перемешивают и центрифугируют в течение 10 мин при частоте вра-щения 5000-6000 мин- 1 . Интенсивность окраски измеряют на- фотоэлейтроколо-риметре при длине волн 540-560 нм или иа спектрофотометре при длине волнь? 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм. Концентрацию истинного пептона в пробе определяют по градуировочному графику»,

Пункт ЗЛО. Заменить слова: «Определение содержания свободного белка» ха «Определение свободного белка»*

Пункт 3,11 Л. Исключить слова: «по СТ СЭВ 222-75»,

(ИУС № 2 1987 г.)

Редактор В. С. Бабкина Технический редактор Ф. И. Шрайбштейн Корректор Э. В. Митяй

Сдано в наб. 14.10.80 Подп. в леч. 02.02.81 1,0 п. л. 1,12 уч,-изд. л. Тир. 4000 Цена 5 коп.

Ордена «Знак Почета» Издательство стандартов, Москва, Д-557, Новопресненский пер., д. 3. Вильнюсская типография Издательства стандартов, ул. Миндауго, 12/14. Зак. 5123

ОСНОВНЫЕ ЕДИНИЦЫ СП

ПРОИЗВОДНЫЕ ЕДИНИЦЫ С И,ИМЕЮЩИЕ СОБСТВЕННЫЕ НАИМЕНОВАНИЯ

Величина			Выражение производной единицы
Величина	наименование	обозначение	через другие единицы СИ	через основные единицы СИ


Давление
Энергия, работа, количество теплоты				К г ‘КГ«С~*
Мощность, ноток энергии Количество электричества.				* 8 «ЖГ-СГ*
электрический заряд Электрическое напряжение,
электрический потенциал				M 2 Kr-c~ s A"
Электрическая емкость				м- г *кг“ 1 »е 4 -А а
Электрическое сопротивление				м 3 -кг-с ~^^А~ 2
Электрическая проводимость				м~*кг"’ , «с"А 2
Поток магнитной индукции				м 2 -кг-с -2 -А"
Магнитная индукция				кг-с~ 2 -А“ 1
Индуктивность				м 2> кг"С -2 *А~ 2
Световой поток
Освещенность				М”**кд-ср
Активность нуклида	беккерель
Доза излучения

* В эти два выражения входит, наравне с основными единицами. СИ, дополнительная

единица-с горадизи

УДК т.ШЗ-.ШМА Груш» Н18 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР ПЕПТОН СУХОЙ ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ Те>нмч*сима условие Э(у Гсгтел"аКоп рср(оп!ог Ьас1спо1ое1слI оЬеесЕз ТесЬтга! сопйШопа ГОСТ 13805-76 винен ГОСТ 11(01-М Лэстаиоаяеньом Го*»двре таенного комитет* стандартов Совета Министр О* СССР в* 3* мрем ИН г. и* ИП г. М(е4ми« стандарт» прекиадтетсв «ю ммомт Настоящий стандарт распространяется на ферментативный пептон для бактериологических келен, получаемый из рубцов и л стошки крупного рогатого скота, овей и кол, а также из желудков свиней с использованием слизистой оболочки желудков и поджелудочной железы, 1, ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ 1.1, Ферментативный пептон для бактериологических целей должен изготавливаться в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическим правилам, утвержденным в установленном порядке. \2. Ферментативный пептон для бактериологических целей по фнзнко-хнмнческни н биологическим показателям должен соответствовать требованиям и кормам, указанным в табл. I. Таблице! Х"ф>:м(ф"!-™»> К Н1фК1 Внешний вн.ч Цвет Завах Аморфный ояпородный порошок От Гимого до желтого Характерный, без гнилостного Издание официальное Перепечатня воспрещена Переиздание. Апрель 1980 г © Издательство стандартов, 1981

Стр. 2 ГОСТ «*0>-76 Продолжение гай.!. I I 1.11-1 |||-.»_н II- 1ИШЛ1СЛП Концентрации нолирйдных покоя (ОН) Содержание нерастворимых примесей. %. не более Содержание маги, %, не более Содержание сулъ-Ьирппаииои юлы, Ь. не более Содержание истинного пептона. %, не менее Содержание общего акта, %, не менее Содержание аэога аминогрупп аминокислот и ниш» пептидов, %, не менее Содержанке свободного белка, оптическая плотность, не более Содержание хлоридов в пересчете на хяор-нон. ве Солее Содержание солей тяжелых металлов Наличие свободного индола Способность поддерживать рост микробов, оптическая плотность, «е менее 5*арпу1осоеси« ясгеи* «Лассманов» Е&спепсЫа соП штамм 675 51*ер1ососси* 1аеса!!& штамм 6783 3. правила приемки Харзктерисгаа ■ "при» С<л-7,0 1,0 7.0 5.0 70,0 1-У) а* Не допускается То же Рост типичный 0.40 03* О.» 2.1. Ферментативный пептон для бактериологических целей принимают сериями. Под серией следует понимать количество пептона, изготовленное из одноименного вида сырья за один технологический цикл, получившее свой номер и оформленное одним документом о качестве. 2.2. Дли контроля качества ферментативного пептона от каждой серии препарата отбирают выборку в размере: от серии до 104) единиц фасовки - 3%; от серн» свыше 100 единиц фасовки - 1%. 2.3. Выборку отбирают из единиц фасовки, взятых из разных мест серии. 2.4. При неудовлетворительных, результатах испытаний хотя бы по одному показателю по нему проводят повторные испытания на удвоенном количестве проб, отобранных от тон же серии пептона. Результаты испытаний распространяются на всю серию. 3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ 3.1. Метод отбора проб 3.1.1. Содержимое отобранных единиц фасовки тщательно перемешивают н отбирают общую пробу массой не более 500 г.

гост 11801-76 Ор. 3 Из обшей пробы ферментативного пептона выделяют четыре гробы для анализа массой не менее 100 г каждая. Отобранные пробы помешают в чистые сухие банки с притертыми пробками. Пробки заливают парафином или смолой. 3.12. На банки с пробами ферментативного пептона наклеивают этикетки с указанием: наименования предприятия изготовителя; наименования препарата; даты изготовления; номера серии; даты взятия пробы; обозначения настоящего стандарта. Две пробы используют для анализа, а две - оставляют в архиве государственного контролера в течение 4 лет. 3 2. Внешний вил. цвет н запах пептона определяют оргаиолеп-тически. 3.3. Опрсдслспис концептрацнн водородных ионов (рН) 3.3.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют; рН-метр; (весы лабораторные; * колбу стеклянную по ГОСТ 1770-74 ; цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74 ; фильтры бумажные: воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 . 3.3.2. Проведение испытания Навеску пептона массой I г. взвешенную с погрешностью не более 0.02 г. помещают в колбу и растворяют в 99 мл прокипяченной и охлажденной дистиллированной воды. В растворе допускается незначительный осадок, который отфильтровывают через бумажный фильтр. В прозрачном фильтрате 1%-ного раствора пептона определяют концентрацию водородных ионов (рН) в соответствии с правилами, прилагаемыми к рН-мегру. 3.4. Определение содержания нерастворимых примесей 3.4.1. Аппаратура, материалы и реактивы Для проведения испытания применяют; весы аналитические; шкаф сушильный на 105°С; стаканчики дли взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70; эксикатор по ГОСТ 6371-73; цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74 ; пробки вэтно-марлевые;

Стр. 4 ГОСТ 13805^-7* фильтры бумажные; натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 . 0,1 и. раствор, воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 . 3.4.2. Проведение испытания Навеску пептона массой 5 г. взвешенную с погрешностью м боле* 0.0002 г. помешают в колбу, добавляют 95 мл дистиллированной воды и тщательно перемешивают, добиваясь максимального растворения пептона, Приготовленный 5%-ный раствор неп-тона фильтруют через бумажный фильтр, предварительно высушенный в бюксе до постоянной массы н взвешенный с погрешностью не более 0,0002 г. По окончании фильтрования раствора пептона фильтр промывают 50 мл дистиллированной воды, помещают в бюксу н высушивают до постоянной массы при!05*С Первое взвешивание производят после высушивания фильтра в течение 3 ч. последующие взвешивания - после 30 мни высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0.0002 г. Профильтрованный раствор 5%-ного пептона разбавляют в 5 рад дистиллированной водой. Полученный 1%-ный раствор пептона доводят 0,1 к. рнхтнором гидрата окиси натрия до рН 7.7 н кипятят в течение 5 мин. Раствор должен остаться прозрачным, без образования осадка. После кипячения I %-пый раствор пептона разливают в пробирки по 7-8 мл. закрывают ватными пробками и выдерживают в автоклаве в течение 30 мин прн 0,15 МПа. Раствор должен остаться прозрачным, бел образования осадка. 3.4.3. Обработка результатов Содержание нерастворимых примесей (X) в процентах вычисляют по формуле д-- (Дг-лн) -400 где т - масса пептона, взятая для приготовления 100 г 5%-иого раствора пептона, г; т, - масса бюксы с фильтром до фильтрования, г; т3 - масса бюксы и фильтра с осадком после высушивания, г. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных опрс-аеленяВ не должны превышать 0,1 V 35 Определение содержания влагм 3.5.1, Аппаратура Для проведения испытания применяют: весы аналитические;

ГОСТ Л Стр. 5 шкаф сушильный лабораторный на 105°С; стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70; эксикатор по ГОСТ 6371-73. 3.5.2. Проведение испытания Навеску пептона массой 1,5-2,0 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г. помещают в бюксу, предварительно высушенную до постоянной массы. Бюксу с навеской помешают в сушильный шкаф и сушат до постоянной массы при Ю5°С. Первое взвешивание производят через 1 ч, последующие - через 30 мни высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0,0002 г. 3.5.3. Обработка результатов Содержание влаги (X,) в процентах вычисляют по формуле где го - пасса навески пептона до высушивания, г; т, - масса навески пептона после высушивания, г. За окончательный результат испытания принимзют среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%. 3.6. Определение содержания сульфированной золы 3.6.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют: веси аналитические; элемент нагрева (плитку, горелку); печь муфельную; тигли фарфоровые но ГОСТ 9147-73; кислоту серную по ГОСТ 4204-77 , концентрированную. 3.6.2. Проведение испытания Навеску пептона массой 1,0-1.5 г. взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помешают в тигель, предварительно прокаленный до постоянной массы. В тигель с навеской пептона добавляют I мл концентрированной серной кислоты и осторожно нагребают смесь на плитке до удаления избытка серной кислоты, после чего тигель переносят в муфельную печь н продолжают озоление при температуре 500-600*С до постоянной массы золы. 3.6.3. Обработка результатов Содержание сульфированной золы (Хг) в процентах вычисляется по формуле V «I *"100 где /л - масса пептона до прокаливания, г; ят| - масса золы после прокаливания, г.

Стр. 6 ГОСГ 11801-76 За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%. 37. Определение содержания истинного пептона 3.7.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют: фотоэлектроколорнметр или спектрофотометр; пипетки вместимостью I н 5 мл; пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-75; воронки стеклянные; фильтры бумажные; натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 , 10%-иыЙ раствор; медь сернокислую по ГОСТ 4165-78 , 2%-ный раствор; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 . 3.7.2. Подготовка к испытанию Построение градунровочного графика По оси абсцисс откладывают концентрацию истинного пептона в растворе, по оси ординат-величину оптической плотности (Е) этого раствора согласно данным, приведенным в табл. 2. Приведенные в табл. 2 величины оптической плотности (Е) получены измерением на фотоэлектроколорнметре при длине волны 540 им растворов специально приготовленной серии пептона, содержащей минимум свободного белка н аминокислот и максимум пептидов. Таблице 2 К«аа

ГОС1 ПВО!-7* Стр. 7 0,5 мл 10%-ного раствора гндрата окиси натрия и 0,5 мл 2%-иого раствора сернокислой мели. Смесь в пробирках хорошо перемешивают и через 2 мни фильтруют через бумажные фильтры. Интенсивность окраски измеряют на фотомектроколориметре при длине волн 540-560 нм или на спектрофотометре при длине волны 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм. Концентрацию истинного пептона в пробе определяют по градунровочному графику. 3.7.4. Обработка результатов Содержание истинного пептона (X») в процентах вычисляют но формуле у А пум где А - содержание истинного пептона в испытуемом растворе, определенное по градуировочному графику. %; 0.5-масса пептона (препарата), содержащаяся в 100 г 0,5%-иого раствора, г. .За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 5%. 3.8. О п ред ел ен и е содержании общего азота Содержание общего азота определяют методом Къельдаля или методом Кьельдаля и сочетании с изотермической отгонкой в чашках Конвея. 3.8.1. Определение содержания общего азота методом Къель-лаля 3.8.1.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют: весы аналитические; колбы Къельдаля вместимостью 50-100 мл по ГОСТ 10394-72; аппарат для отгонки аммиака; пипетки вместимостью 1, 2. 5 мл:. бюретки вместимостью 25 или 50 мл с ценой деления 0,05 мл; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 ; кислоту серную по ГОСТ 4204 -77. концентрированную н 0,1 в. раствор; натрия гидрат окисн но ГОСТ 4328-77 . 30-33%-ный и 0.1 н. растворы, приготовленные на предварительно прокипяченной дистиллированной воде; водорода перекись по ГОСТ 10929-76 ; метиловый красный по ГОСТ 5853-51; метиловую синь; спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67 ;

Сгр. В ГОСТ 1Ш5-76 метиловый оранжевый по ГОСТ 10816-64. 0.1%-кыП раствор. 3.8.1.2. Проведение испытания В колбу Къельдаля помещают I мл 5%-аого раствора пептона к прибавляют 2 мл концентрированной серной кислоты. В горлышко колбы вставляют стеклянный грушевидный баллончик или небольшую воронку с запаянным кончиком и минерализуют пробу сначала на слябом огне, затем степень нагрева усиливают, не допуская выбрасывания кипящей смоги в узкую часть колбы. Минерализацию проводят в присутствии катализатора перекиси водорода. Катализатор добавляют после начала кипения по 0,5 мл через каждые 15-20 мнн до полного обесцвечивания раствора. После охлахдення содержимое колбы переносят с 10-12 мл дистиллированной воды в колбу для отгона. Полноту переноса проверяют по индикатору метиловому оранжевому. Последняя порция смывных вод должна остаться желтой. В приемную колбу аппарата Къельдаля наливают 20 мл 0,1 н. раствора серной кислоты и 2 капли индикатора Таширо. Индикатор Ташнро готовят путем растворения 0,4 г метилового красного в 0.2 г метиловой сини в 200 мл 96%-но го этилового спирта. Отгонную колбу подсоединяют к холодильнику н парообразователю. Содержимое отгонной колбы нейтрализуют по индикатору метиловому оранжевому 30-33%-иым раствором гидрата окиси натрия. Отгон проводят до тех пор. пока в приемной колбе соберется около 70 мл раствора. Содержимое приемной колбы титруют 0.1 и. раствором гидрата окиси натрия до перехода окраски раствора от фиолетовой к зеленой. Одновременно ставят контрольный опыт на реактивы, для чего вместо раствора пептона а колбу для минерализации берут I мл дистиллированной воды. 3.8.1.3. Обработка результатов Содержание общего азота (Л*.) в процентах вычисляют по формуле х,--^_-. количество 0,1 н. раствора серной кислоты, налитое в приемную колбу, мл; поправочный коэффициент к титру 0,1 н. серной кислоты; количество 0.1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой нлн контрольной пробы, мл; поправочный коэффициент к титру 0.1 н. раствора пирата окнеи яатрия; масса пептона, содержащаяся в 1 мл 5Vнога раствора, я 1чтого на анализ, г; где V-/С - V,- К,-0.05 -

ГОСТ НИИ-74 Стр. 9 0.0014 - количество азота, эквивалентное I мл 0,1 н. раствора серной кислоты, г. За окончательный результат испытания принимают разность между средними арифметическими результатов двух параллельных определений в опытных н контрольных пробах. Допускаемые расхождения между результатами двух параллельпых определений не должны превышать 0,2%. 3.8.2. Ооределеннс содержания общего азота методом Къельда-ля в сочетании с изотермической отгонкой в чашках Конвея 3.8.2.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют; микробюретки; пнпеткн вместимостью I, 2, 5, 10 мл; чашки Конвея; колбы Къельдаля вместимостью 50-100 мл по ГОСТ 10394-72; мерные колбы вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74 ; вазелин по ГОСТ 5774-76 ; водорода перекись по ГОСТ 10929-76 ; метиловый красный по ГОСТ 5853-51; метиленовую синь; спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67 ; кислоту серную ГОСТ 4204-77 , концентрпроваиную и 0,025 н. раствор; натрия гидрат окиси (натр едкий) по ГОСТ 4328-77 , 40%-ный и 0,025 в. растворы; дистиллированную воду по ГОСТ 6709-72 . 3.8.2.2. Подготовка к испытанию Приготовление индикатора Таширо по п. 3.8.1.2. 3.8.2.3. Проведение испытания 5 мл 5%-ного раствора пептона минерализуют с подогревом в колбе Къельдаля с 10 мл серной кислоты (концентрированной) ♦ до получения бесцветного раствора. В качестве катализатора используют 0,5 мл пергидроля. После минерализации образец переносят количественно в мерную колбу на 100 мл ч доводят до метки дистиллированной водой. Во внутреннюю часть чашки Конвея наливают точно 2 мл 0.025 и. раствора серной кислоты. Чтобы используемая жидкость не растекалась, чашку устанавливают наклонно. Затем закрывают крышкой, смазанной вазелином, оставляя небольшую шель, через которую пипеткой вносят в наружную часть чашки I мл испытуемого раствора после минерализации. Передвигают чашку так, чтобы осталась шель шириной 5-6 мм с противоположной стороны и через нее быстро вливают 4 мл раствора 40%-ной щелочи. Чашку плотно закрывают крышкой, осторожно перемешивают круговыми движениями содержимое н оставляют на 15-18 ч. Несвязанный с зммнаком избыток кислоты

Стр. 10 ГОСТ ЦВМ-76 оттитровываюг 0,025 н. раствором едкого натра по индикатору Таширо. Параллельно ставит контрольную пробу, лля чего во внешнюю часть чашки Конвоя помешают вместо испытуемого раствора дистиллированную воду. 3.8.2.4. Обработка результатов Содержание общего азота (Х$) в процентах вычисляют по формуле « 0,00035(1"- У,)К-Ю0.1ОО-1ОО 6-5-1 где К-количество 0.025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование контрольной пробы, мл; V. - количество 0,025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл; К - поправочный коэффициент к титру 0,025 н. раствора едкого натра; 0.00035 - количество азота, эквивалентное 1 мл 0,025 н. раствора едкого натра, г; 5-масса пептона, взятая для получения 5%-ного раствора, г; 5-количество препарата, взятое для минерализации, мл; ] - количество испытуемого раствора, мл. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%. 3.9. Определение содержания азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов 3.9.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют; рН-метр; стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-72; пипетки вместимостью 1, 2 и 20 мл; бюретки вместимостью 5 и 10 мл с ценой деления 0.05 мл; формалин технический по ГОСТ 1625-75; натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 , 0,1 н. раствор; кислоту серную по ГОСТ 4204-77 , 0,1 н. раствор; фенолфталеин по ГОСТ 5850-72, 1%-ный спнрговый раствор; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 . 3.9.2. Подготовка к испытанию Непосредственно перед работой готовят формольную смесь. Для этого к 50 мл формалина добавляют I мл 1%-мого раствора фенолфталеина и 0,1 и. раствором гндрата окнек натрия доводят окраску смеси до слабо-розовой.

ГОСТ 13805-74 Стр. 11 3.9.3. Проведение испытания К 2 мл прозрачного 5%-ного раствора пептона, приготовленного в соответствии с п. 3.4.2. приливают 18 мл дистиллированной воды и доводят рН смеси до 7.0 погенцнометрически 0.1 н. раствором гидрата окнен натрия или серной кислоты. Затем приливают 2 мл формальной смеси и при постоянном перемешивании потенциометрически титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси нат-трня до рН 9.2. Одновременно ставят контроль на реактивы, для чего вместо 2 мл 5%-ного пептона берут 2 мл дистиллированной воды. 3.9.4. Обработка результатов Содержание азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов в пептоне (X.) в процентах вычисляют по формуле * -^«И-. где V - количество 0.1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл; V)- количество 0.1 и. раствора гидрата окиси иатряя, израсходованное на титрование контрольной пробы, мл; К - поправочный коэффициент к титру 0.1 н. раствора гидрата окиси натрия; 0.0014 - количество азота, эквивалентное 1 ил 0,1 к. раствора гидрата окксн натрпя, г; 0,1--масел пептона, содержащаяся в 2 мл 5%-ного пептоне, г. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0.2%. 3 10. Определение содержания свободного бел- к а 3 10.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют: фото з> л е кт ро кол о р и м етр; пипетки вместимостью 5 и 10 мл; пробирки стеклянные по ГОСТ 10515 75; кислоту трихлоруксусную 20%-ный раствор. 3.10.2. Проведение испытания К 5 мл фильтрата 5%-ного раствора пептона, приготовлен ною в соответствии с п. 3.4.2. добавляют 5 мл 20%-ного раствора три-хлоруксусиой кислоты в хорошо перемешивают. Через 5 мин определяют оптическую плотность смеси па фотоэлектрл колориметре при длнис волны 630 ни (красный светофильтр) в кюветах с рабочей длиной 10 мм против того же раствора пептона, разведенного 1: I дистиллированной водой. 3.10.3, Обработка результатов

Стр. I? ГОСТ 13105-76 За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,05%, 3.11. Определение содержания хлоридов 3.11.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют: весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г; элемент нагрева (горелку, плитку); пипетки вместимостью I, 2. 10, 20 я 25 ил; бюретки вместимостью 25 мл с ценой деления 0,05 мл; стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-72; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 ; серебро азотнокислое по ГОСТ 1277-75 . 0,1 н. раствор; квасцы железоаммониевые по ГОСТ 4205-77, насыщенный раствор; калий роданистый по ГОСТ 4239-77 или аммоний роданистый по СТ СЭВ 222-75, 0,1 и. раствор; кислоту азотную по ГОСТ 4461-77 , концентрированную. 3.11.2. Проведение испытания К 20 мл 1%-иого раствора пептона, приготовлениого в соответствии с п 34 2. добавляют 30 мл дистиллированной воды, 1 мл концентрированной азотной кислоты и 10 ил 0,1 ь. раствора азотнокислого серебра. Раствор нагревают до начала кипения и быст-ро охлаждают путем погружения стакана с раствором в сосуд с водой комнатной температуры. После охлажзеняя смеси добавляют 2 ил насыщенного раствора железоаммонневых квасцов (индикатор) и титруют 0,1 к. раствором роданистого калия (или роданистого аммония) до появления кнрпичио-красного окрашивания. 3.11.3. Обработка результатов Содержание хлоридов "А".-) в процентах вычисляют по формуле У (УЛ-К1К",)-0,0О3545- 100 Л} -

гоег аш-п Сгр, 13 За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,1 % 3.12. Определение солей тяжелых металлов 3.12.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют: весы технические с погрешностью взвешивания не более 0.01 г; элемент нагрева (плитку, горелку): печь муфельную; тнгли фарфоровые по ГОСТ 9147-73; цилиндры мерные вместимостью 10 мл по ГОСТ 1770-74 ; кислоту серную по ГОСТ 4204-77 . концентрированную; аммоний уксуснокислый по ГОСТ 3117-78 , насыщенный раствор; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 ; кислоту уксусную по ГОСТ 61-75 . 10%-ный раствор; натрий сернистый по ГОСТ 2053-77 . насыщенный раствор; натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 , 10%-ный раствор; лакмус или универсальный индикатор. 3.12.2. Проведение испытания Навеску пептона массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0.02 г, помешают в тигель, смачивают 2 мл концентрированной серной кислоты и осторожно озоляют сначала на плитке или горелке, а затем в муфельной печи при 500-600"С до получения однородной золы светло-серого цвета. После охлаждения тигля золу заливают I мл насыщенного раствора уксуснокислого аммония и разводят 5 мл дистиллированной воды. Содержимое тигля фильтруют в цилиндр через бумажный фильтр. Тигель и фильтр промывают дистиллированной водой, доводя объем раствора в цилиндре до 10 мл. Реакцию фильтрата в цилиндре доводят по лакмусу до нейтральной или слабокислой, добавляя по каплям 10%-ную уксусную кислоту или 10%-ный раствор гидрата окиси натрия. Затем прибавляют 1 мл 10%-ноЙ уксусной кислоты. 5 капель насыщенного раствора сернистого натрия и перемешивают. Через 5 мнн в растворе не должно быть осадка и желтого окрашивания раствора. 3.13. Определение наличия свободного ннлола 3.13.1. Аппаратура и реактивы Для проведения испытания применяют; пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-75; пипетки вместимостью I. 2 и 10 ил; пробки резиновые конусные по ГОСТ 7852-76;

Стр. 14 ГОСТ 13*05-7* В пробирку с 10 мл 1%-ного раствора пептона прибавляют 2 мл амилового спирта, закрывают пробирку пробкой, хорошо взбалтывают н прибавляют 1 мл 0,1%-ного раствора азотистокяс-лого калия и 1 мл концентрированной серной кислоты. Смесь осторожно перемешивают и дают отстояться. В спиртовом слое не должно появляться розового окрашивания. Появление розового окрашивания спиртового слоя указывает на наличие в пептоне свободного индола. 3.14. Определение способности поддерживать рост микробов 3.14.1. Аппаратура, материалы и реактивы Для проведения испытании применяют: весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г; рН-метр;" термостат на 37°С; автоклав; фотоэл ект ро кол о р и метр; пробирки по ГОСТ 10515-75; пробки вятно-марлевые; микропипетки вместимостью 0,2 мл; пипетки вместимостью 10 мл; бюретки вместимостью 25 или 50 мл; фильтры бумажные; питательные среды (мясную воду по ГОСТ 20729-75); агар микробиологический по ГОСТ 17206-71 или другой микробиологический агар; натрий хлористый по ГОСТ 4233-77 . 3.14.2. Подготовка к испытанию Готовят мясопептонный бульон (МПБ) в соответствии с требованиями ГОСТ 20730-75 и мясопептонный агар (МПА). Для приготовления МПБ к мясной воде добавляют 1% испытуемого пептона. 0.5% хлористого натрия и устанавливают рН среды 7,4. Для приготовления МПА к мясной воде добавляют 1% испытуемого пептона 0,5% хлористого натрия, 2% микробиологического агара и устанавливают рН среды 7,4. МПБ и МПА фильтруют, разливают по 8 мл в пробирки, закрывают ватпомарлсвымн пробками и пергаментными колпачками н стерилизуют в автоклаве в течение 30 мни при 0.15 МПа. 3.14.3. Проведение испытания Пробирки со стерильными МПБ и косым МПА засевают суточными контрольными культурами. Посев каждой культуры производят микропипеткой по 0.2 мл в три пробирки с МПБ и МПА. спирт амиловый; калий аэотнстокнслый по ГОСТ 4144-79 , 0,1")о-ный раствор; кислоту серную по ГОСТ 4202- -75, концентрированную.

ГОСТ 11805-Те Ор. 15 Инкубацию проводят 24 ч при 37-38*С. Типичность роста суточных культур определяют на МП А визуально и под микроскопом. Рост должен быть типичным для каждого штампа микроорганизмов. Интенсивность роста оценивают в МПБ на фотоэлектроколорнметре при длине волны 620-640 им в кювете с рабочей длиной 5 мм. 4. ПАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ 4.1. Пептон фасуют массой нетто от 250 до 1000 г в жестяные банки по ГОСТ 5981-71 или, по соглашению с потребителем, массой нетто 30 кг в фанерные бочки по ГОСТ 5958-79 с прокладкой полиэтиленовой пленки по ГОСТ 10354-73. Жестяные банки герметически укупоривают. 4.2. На банку наклеивают этикетку с указанием: наименования предприятия- изготовителя: наименования препарата: номера серии; массы нетто; условий хранения; срока годности; обозначения настоящего стандарта. 4.3. Банки с пептоном упаковывают в дощатые неразборные ящики для консервов" по ГОСТ 13358-72 или в ящики из гофрированного картона для консервов и пищевых жидкостей по ГОСТ 13516-72. 4.4. Каждый ящик н бочку маркируют по ГОСТ 14192-77 с указанием дополнительных данных: наименования предприятия-изготовителя; наименования препарата; номера серии; даты изготовления; массы брутто и нетто; условий хранения; срока годности; обозначения настоящего стандарта. Нл каждый ящик илн бочку наносится предупредительный знак а БОИТСЯ СЫрОСТИ». 4.5. Пептон хранят в сухом помещения при температуре не выше ЗО"С. Срок годности пептона в герметически закрытых банках 3 года, в фанерных бочках - I год со дня изготовления. 4.6. Пептон транспортируют всеми видами транспорта. 4.7. При нарушении герметизации тары пептон хранят я плотно закрытом сосуде или полиэтиленовом мешочке в сухом помещении при температуре от 0 до 8°С не более 1 месяца.

Ивмеиеняс "" ■ ГОСТ 13805-76 Пептон сухой ферментативный дли о. мгрио-■от■-. .-ли■ целей. Технические условия Постановлением Государственного комитет» СССР гн> стандарта* »т 31.1281 Л 5930 срок Иван установлен с (11.01.82 Под наименованием стандарта проставить код: ОКП 93 -481. По всему тексту стандарта запенит единицу взмереяня: мл на см1. Пункты 2.2, 23. 3.1.1. Заменить слова; «едвенп фасовки» на «банок». Пункт 22 яополввгь словами: «от сервя в бочках - каждую бочку». Пункт 2.3. Заменить слова: «отбирают* на «составляют». Пункт 2.4. Заменить слова: «от то! же серии пептона* на «от той яр выборки*. Пувкт 3.1.1 дополнить словами: «При отбор* проб из бочек отбирают пептон массой не менее 500 г. Выделение пробы дли анализа производят, как описано выше*. Пункты 3.4.1. 3.7.1. 3.3.1.1, 3.8.2.1. 3.9.1, 3.12.1. Заменить ССЫЯ№ ГОСТ 4328-66 на ГОСТ 4328-77 . ГОСТ 2053-66 на ГОСТ 2053-77 . Пункт 3.13.1. Заменить ссылки: ГОСТ 7852-65 в> ГОСТ 7852-76. ГОСТ 4144-65 на ГОСТ 4144-7», ГОСТ 4202-66 иа ГОСТ 4202-75 . Пункт З.И.1. Заменить ссылку: ГОСТ 4233-66 на ГОСТ 4233-7?. Пункт 4.1 после сдое «фанерные бочки? дополнить словами: «типа II»; мскить ссылку: ГОСТ 5958-70 па ГОСТ 5958-79. Пункт 4.4. Заменить слова: "Каждый ящик и бочку маркируют по ГОСТ 14192-71 с указанием дополнительных данных* на «Транспортная маркировка по ГОСТ 14192-77 с указавшем дополнительных данных», «наименования пвсд-приятия-изготояитела» на «наименования предприятия-изготовителя и его товарного знака»; «предупредительный» на «мчнкпуляциовный». Пункт 4.6 дополнить словами: «с соблюдением правил перевозки грузов, действующих на данном виде транспорта. Укрепление грузовых мест в трансфертные пакеты при перевозке грузов же* лемюдорожнич транспортом но ГОСТ 21929-76 и ГОСТ 15901-ТО*.

Группа Н18 И 1мг"ие»не л) 2 ГОСТ 13805-Тв Пептон су*о* фсрмг11тл1и1«ый для баалернол*-г"П"(цел г л Теяничесяие условия Постаиовленяем Государственного домята. СССР па стандартам от (ИЛИ Л* 3332 срок аяедеьия установлен с тлив Пункт 12. Таблица I Граф» Наименование и«ииъ|геая» " Заменять слова «Содержание свободного бела*, оптическая плотность, но более» на «Наличие свободного бсма, оптическая олотвкктъ. не более». «Содержании* солеи тяжелы» металлов» на «Наличие содей тяжелых металлов»; «Содержание» на «Массоваа доля» (7 в») Пункты 3.4. 3.43. 35. 353. 3 6. 363. 3.7. 374, 38. 381. 1.8.13. 3*7. 88.24 39. 3.9.4. 3.11. 3 113 Заменить сжим «содержание» на «массовая доля» Пункт 3.4 1 Запенить ссылку. ГОСТ 11770- 74 на ГОСТ 1770-74 . Пункт 3.7.1 ятложитъ и новой ревнив*; (Продолжение ем. с. 290)

(Продолжение изменениях ГОСТ 1Ш5-7б-> «3.71. Лппораура и реактивы Для проведения испытании применяют: фотомектроколоркметр или спехтрофото: центрифуги настольные тнпа ОПк-8 Н2, пнпегкн вмссгнмооью I н 5 см1 по ГОСТ пробирки стеклянные по ГОСТ 25336-82 7. 10%-ный расгнлр; 2 %-иыЙ раствор: Г 80292-74; натрия гидрат онисн по I «л. I меяь сернокислую но ГОСТ -I воду днетитлиркввимую по ГОСТ 6709-72 ». Пункт 373. Последив! а&ааа изложить в «о*ой релаиивв; -Смесь в прэбкр-кад хорошо перемешивают и сем рифугчруюг в "осаве 10 ив* яри.иип. ярв-ваеная 5000-6000 мим-" Ннгенсигмость окраски итерают ив фотоместроколо-ряметре арн длине волн 540-560 им влв на снежтрофогометре ври длине волны* 540 ни в кюветах

Цвмв % коп. ОСНОВНЫЕГДППИЦЫ С» Еввкивд Наимаомвмв Овнп<ннв ■НВВТНРОВВВВ длима масса ■реши сила ^тантрического тока ткрмодинлничсская ТЕМПО-ЛТУРЛ кодичагио шдества сш1а свагл ■мир киамрам* сонуядд аниер ис.п.шш моль -.11: I] I м жг с Л к Мвяь кд П«»"1 НО.» Тшкяи* угол ДОПОЛНПТЕЛЬПЫЕ ЕДИНИЦЫ СИ радмап. Ра* смрадна» "р т К шо1 ей гас! ег лронзкодные вгашщы сн.нмшощпв соъстакшыь наименования Величава Ьеиавш -1 иатеноаоан* | оВоавачавве чирМ ДВУИН гдинпвк СИ ч.|»,1 исноааМ* мяшоды СИ Чтив при - «-< Сап ньютон н М" н1>и " вдвдвжп Паскаль Пв Н/м» ■-■.нг-с-* Шырша. работа, (отнпо тппюгч джоуль Дж П- м"-»г<-* Чи1|и«)ц выи* икр>на ватт Вт ■ №»/ м".вхс- КО.ЩК1В* ШЫВИЧОП&а, ■лплрпп1. г А й..; .1.1 кузен 1Сл Ас с-А вввфвчвявИ! в«твщвад опт в Вт/А х"-кго-"-А-" Элгатричмваа «п«п фарад ф Кя/В м~*"НГ-"*"-Л" Имюрьчичл слпроппкваа ом Ом В/А »Гхг с -" А-* Зл.тркч.г»». щкшадтихть евввавп См А/В м-"-нг-"-е"-А" П(1ТО» НП1Ч1ПОЙ ПНДУАВНВ псбер ВО Ве в"-«-с-" -Аг1 """ИИ!" |."|И шла. Тя В6/м" хтв-.А-1 Ииаув! низость генрн Гя В6/А и"«г с-"А-з СастаиЛ потоп арамеи ды.- ндер 1* Оевпцгижгь ■им яя - *- *лср 1 ДДяшвШпв пумавхв боньорель Ля - «Г* Гр - ч".с " В 1111 ВВВВНВШВИ МвДЯТ, В«рЧВ»» Г | , ищш.ч: I: ■ .|.(I.I■ (."". Я09еЯВ!«ГГ.П*«Г, .■ ■ |Щ II- ■ ПЧ<ЧДИ>.(

ГОСТ 13805-76*

Группа H18

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ПЕПТОН СУХОЙ ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ

Технические условия

Dry fermentation peptone for bacteriological purposes.
Specifications

Дата введения 1977-01-01

Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 29 апреля 1976 г. N 1002 срок введения установлен с 01.01.77

Ограничение срока действия снято по решению Межгосударственного Совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 5-92)

ВЗАМЕН ГОСТ 13805-68

* ПЕРЕИЗДАНИЕ (август 1995 г.) с Изменениями N 1, 2, утвержденными в декабре 1981 г., ноябре 1986 г. (ИУС 3-82, 2-87).

Настоящий стандарт распространяется на ферментативный пептон для бактериологических целей, получаемый из рубцов и летошки крупного рогатого скота, овец и коз, а также из желудков свиней с использованием слизистой оболочки желудков и поджелудочной железы.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

Таблица 1


Наименование показателя	Характеристика и норма
Внешний вид	Аморфный однородный порошок
	От белого до желтого
	Характерный, без гнилостного
Концентрация водородных ионов (рН)
Массовая доля нерастворимых примесей, %, не более
Массовая доля влаги, %, не более
Массовая доля сульфированной золы, %, не более
Массовая доля истинного пептона, %, не менее
Массовая доля общего азота, %, не менее
Массовая доля азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов, %, не менее
Наличие свободного белка, оптическая плотность, не более
Массовая доля хлоридов в пересчете на хлор-ион, %, не более
Наличие солей тяжелых металлов	Не допускается
Наличие свободного индола
Способность поддерживать рост микробов, оптическая плотность, не менее	Рост типичный
Staphylococcus aereus "Лассманов"
Escherichia coli штамм 675
Streptococcus faecalis штамм 6783

2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ

2.2. Для контроля качества ферментативного пептона от каждой серии препарата отбирают выборку в размере:

от серии до 100 банок - 3%;

от серии свыше 100 банок - 1%;

от серии в бочках - каждую бочку.

2.3. Выборку составляют из банок, взятых из разных мест серии.

2.4. При неудовлетворительных результатах испытаний хотя бы по одному показателю по нему проводят повторные испытания на удвоенном количестве проб, отобранных от той же выборки пептона.

Результаты испытаний распространяются на всю серию.

2.2-2.4.

3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

3.1. Метод отбора проб

3.1.1. Содержимое отобранных банок тщательно перемешивают и отбирают общую пробу массой не более 500 г.

Из общей пробы ферментативного пептона выделяют четыре пробы для анализа массой не менее 100 г каждая. Отобранные пробы помещают в чистые сухие банки с притертыми пробками. Пробки заливают парафином или смолой.

При отборе проб из бочек отбирают пептон массой 500 г. Выделение пробы для анализа производят, как описано выше.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.1.2. На банки с пробами ферментативного пептона наклеивают этикетки с указанием:

наименования препарата;

даты изготовления;

номера серии;

даты взятия пробы;

Две пробы используют для анализа, а две - оставляют в архиве государственного контролера в течение 4 лет.

3.2. Внешний вид, цвет и запах пептона определяют органолептически.

3.3. Определение концентрации водородных ионов (рН)

3.3.1. Аппаратура и реактивы

рН-метр;

весы лабораторные;

колбу стеклянную по ГОСТ 1770-74 ;

ГОСТ 1770-74 ;

фильтры бумажные;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 .

3.3.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0,02 г, помещают в колбу и растворяют в 99 см прокипяченной и охлажденной дистиллированной воды. В растворе допускается незначительный осадок, который отфильтровывают через бумажный фильтр. В прозрачном фильтрате 1%-ного раствора пептона определяют концентрацию водородных ионов (рН) в соответствии с правилами, прилагаемыми к рН-метру.

3.4. Определение массовой доли нерастворимых примесей

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.4.1. Аппаратура, материалы и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы аналитические;

шкаф сушильный на 105 °С;

ГОСТ 25336-82 ;

эксикатор по ГОСТ 25336-82 ;

цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74 ;

пробки ватно-марлевые;

фильтры бумажные;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 , 0,1 н. раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 .

3.4.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в колбу, добавляют 95 см дистиллированной воды и тщательно перемешивают, добиваясь максимального растворения пептона. Приготовленный 5%-ный раствор пептона фильтруют через бумажный фильтр, предварительно высушенный в бюксе до постоянной массы и взвешенный с погрешностью не более 0,0002 г. По окончании фильтрования раствора пептона фильтр промывают 50 см дистиллированной воды, помещают в бюксу и высушивают до постоянной массы при 105 °С. Первое взвешивание производят после высушивания фильтра в течение 3 ч, последующие взвешивания - после 30 мин высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0,0002 г.

Профильтрованный раствор 5%-ного пептона разбавляют в 5 раз дистиллированной водой. Полученный 1%-ный раствор пептона доводят 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до рН 7,7 и кипятят в течение 5 мин. Раствор должен оставаться прозрачным, без образования осадка.

После кипячения 1%-ный раствор пептона разливают в пробирки по 7-8 см, закрывают ватными пробками и выдерживают в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПа. Раствор должен остаться прозрачным, без образования осадка.

3.4.3. Обработка результатов

Массовую долю нерастворимых примесей () в процентах вычисляют по формуле

где - масса пептона, взятая для приготовления 100 г 5%-ного раствора пептона, г;

- масса бюксы с фильтром до фильтрования, г;

- масса бюксы и фильтра с осадком после высушивания, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,1 %.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.5. Определение массовой доли влаги

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.5.1. Аппаратура

Для проведения испытания применяют:

весы аналитические;

шкаф сушильный лабораторный на 105 °С;

стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 25336-82 ;

эксикатор по ГОСТ 25336-82 .

3.5.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1,5-2,0 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в бюксу, предварительно высушенную до постоянной массы. Бюксу с навеской помещают в сушильный шкаф и сушат до постоянной массы при 105 °С.

Первое взвешивание производят через 1 ч, последующие - через 30 мин высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0,0002 г.

3.5.3. Обработка результатов

Массовую долю влаги () в процентах вычисляют по формуле

где - масса навески пептона до высушивания, г;

- масса навески пептона после высушивания, г.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.6. Определение массовой доли сульфированной золы

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.6.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы аналитические;

элемент нагрева (плитку, горелку);

печь муфельную;

тигли фарфоровые по ГОСТ 9147-80 ;

кислоту серную по ГОСТ 4204-77 , концентрированную.

3.6.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1,0-1,5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в тигель, предварительно прокаленный до постоянной массы. В тигель с навеской пептона добавляют 1 см концентрированной серной кислоты и осторожно нагревают смесь на плитке до удаления избытка серной кислоты, после чего тигель переносят в муфельную печь и продолжают озоление при температуре 500-600 °С до постоянной массы золы.

3.6.3. Обработка результатов

Массовую долю сульфированной золы () в процентах вычисляют по формуле

где - масса пептона до прокаливания, г;

- масса золы после прокаливания, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.7. Определение массовой доли истинного пептона

3.7.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

фотоэлектроколориметр или спектрофотометр;

центрифуги настольные типа ОПн-8-У4,2;

пипетки вместимостью 1 и 5 см по ГОСТ 29169-91 ;

пробирки стеклянные по ГОСТ 25336-82 ;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 , 10%-ный раствор;

медь сернокислую по ГОСТ 4165-78 , 2%-ный раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 .

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.7.2. Подготовка к испытанию

Построение градуировочного графика

По оси абсцисс откладывают концентрацию истинного пептона в растворе, по оси ординат - величину оптической плотности () этого раствора согласно данным, приведенным в табл.2. Приведенные в табл.2 величины оптической плотности () получены измерением на фотоэлектроколориметре при длине волны 540 нм растворов специально приготовленной серии пептона, содержащей минимум свободного белка и аминокислот и максимум пептидов.

Таблица 2


Концентрация истинного пептона в растворе, %	Оптическая плотность () раствора

3.7.3. Проведение испытания

Истинный пептон определяют в 0,5%-ном растворе испытуемого пептона. Для этого 5%-ный раствор пептона, приготовленный в соответствии с п.3.4.2, разбавляют водой в 10 раз (0,5 мл 5%-ного раствора пептона и 4,5 см дистиллированной воды).

В пробирку, содержащую 5 см 0,5%-ного раствора испытуемого пептона, добавляют 0,5 см 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 0,5 см 2%-ного раствора сернокислой меди. Одновременно ставят контроль, для чего в пробирку наливают 5 см воды, 0,5 см 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 0,5 см 2%-ного раствора сернокислой меди.

Смесь в пробирках хорошо перемешивают и центрифугируют в течение 10 мин при частоте вращения 5000-6000 мин. Интенсивность окраски измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волн 540-560 нм или на спектрофотометре при длине волны 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм. Концентрацию истинного пептона в пробе определяют по градуировочному графику.

(Измененная редакция, Изм. N 2

3.7.4. Обработка результатов

Массовую долю истинного пептона () в процентах вычисляют по формуле

где - содержание истинного пептона в испытуемом растворе, определенное по градуировочному графику, %;

- масса пептона (препарата), содержащаяся в 100 г 0,5%-ного раствора, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 5%.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.8. Определение массовой доли общего азота

(Измененная редакция, Изм. N 2).

Содержание общего азота определяют методом Къельдаля или методом Къельдаля в сочетании с изотермической отгонкой в чашках Конвея.

3.8.1. Определение массовой доли общего азота методом Къельдаля

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.8.1.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы аналитические;

ГОСТ 25336-82 ;

аппарат для отгонки аммиака;

пипетки вместимостью 1, 2, 5 см по ГОСТ 29169-91 ;

бюретки вместимостью 25 или 50 см с ценой деления 0,05 см по ГОСТ 29252-91 ;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 ;

кислоту серную по ГОСТ 4204-77 , концентрированную и 0,1 н. раствор;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 , 30-33%-ный и 0,1 н. растворы, приготовленные на предварительно прокипяченной дистиллированной воде;

водорода перекись по ГОСТ 10929-76 ;

метиловый красный;

метиловую синь;

ГОСТ 5962-67 *;
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000 . Здесь и далее. - Примечание изготовителя базы данных.

метиловый оранжевый, 0,1%-ный раствор.

3.8.1.2. Проведение испытания

В колбу Къельдаля помещают 1 см 5%-ного раствора пептона и прибавляют 2 см концентрированной серной кислоты. В горлышко колбы вставляют стеклянный грушевидный баллончик или небольшую воронку с запаянным кончиком и минерализуют пробу сначала на слабом огне, затем степень нагрева усиливают, не допуская выбрасывания кипящей смеси в узкую часть колбы. Минерализацию проводят в присутствии катализатора перекиси водорода. Катализатор добавляют после начала кипения по 0,5 см через каждые 15-20 мин до полного обесцвечивания раствора.

После охлаждения содержимое колбы переносят с 10-12 см дистиллированной воды в колбу для отгона. Полноту переноса проверяют по индикатору метиловому оранжевому. Последняя порция смывных вод должна остаться желтой.

В приемную колбу аппарата Къельдаля наливают 20 см 0,1 н. раствора серной кислоты и 2 капли индикатора Таширо. Индикатор Таширо готовят путем растворения 0,4 г метилового красного и 0,2 г метиловой сини в 200 см 96%-ного этилового спирта.

Отгонную колбу подсоединяют к холодильнику и парообразователю. Содержимое отгонной колбы нейтрализуют по индикатору метиловому оранжевому 30-33%-ным раствором гидрата окиси натрия. Отгон проводят до тех пор, пока в приемной колбе соберется около 70 см раствора.

Содержимое приемной колбы титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до перехода окраски раствора от фиолетовой к зеленой. Одновременно ставят контрольный опыт на реактивы, для чего вместо раствора пептона в колбу для минерализации берут 1 см дистиллированной вод

3.8.1.3. Обработка результатов

где - количество 0,1 н. раствора серной кислоты, налитое в приемную колбу, см;

- поправочный коэффициент к титру 0,1 н. серной кислоты;

- количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой или контрольной пробы, см;

- масса пептона, содержащаяся в 1 см 5%-ного раствора, взятого на анализ, г;

- количество азота, эквивалентное 1 см 0,1 н. раствора серной кислоты, г.

За окончательный результат испытания принимают разность между средними арифметическими результатов двух параллельных определений в опытных и контрольных пробах. Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений не должны превышать 0,2%.

(Измененная редакция, Изм. N

3.8.2. Определение массовой доли общего азота методом Къельдаля в сочетании с изотермической отгонкой в чашках Конвея

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.8.2.1 Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

микробюретки;

пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 см по ГОСТ 29169-91 ;

чашки Конвея;

колбы Къельдаля вместимостью 50-100 см по ГОСТ 25336-82 ;

мерные колбы вместимостью 100 см по ГОСТ 1770-74 ;

вазелин по ГОСТ 5774-76 ;

водорода перекись по ГОСТ 10929-76 ;

метиловый красный;

метиленовую синь;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67 ;

кислоту серную ГОСТ 4204-77 , концентрированную и 0,025 н. раствор;

натрия гидрат окиси (натр едкий) по ГОСТ 4328-77 , 40%-ный и 0,025 н. растворы;

дистиллированную воду по ГОСТ 6709-72 .

3.8.2.2. Подготовка к испытанию

Приготовление индикатора Таширо по п.3.8.1.2.

3.8.2.3. Проведение испытания

5 мл 5%-ного раствора пептона минерализуют с подогревом в колбе Къельдаля с 10 см серной кислоты (концентрированной) до получения бесцветного раствора. В качестве катализатора используют 0,5 см пергидроля. После минерализации образец переносят количественно в мерную колбу на 100 см и доводят до метки дистиллированной водой. Во внутреннюю часть чашки Конвея наливают точно 2 см 0,025 н. раствора серной кислоты. Чтобы используемая жидкость не растекалась, чашку устанавливают наклонно. Затем закрывают крышкой, смазанной вазелином, оставляя небольшую щель, через которую пипеткой вносят в наружную часть чашки 1 см испытуемого раствора после минерализации. Передвигают чашку так, чтобы осталась щель шириной 5-6 мм с противоположной стороны и через нее быстро вливают 4 см раствора 40%-ной щелочи. Чашку плотно закрывают крышкой, осторожно перемешивают круговыми движениями содержимое и оставляют на 15-18 ч. Несвязанный с аммиаком избыток кислоты оттитровывают 0,025 н. раствором едкого натра по индикатору Таширо. Параллельно ставят контрольную пробу, для чего во внешнюю часть чашки Конвея помещают вместо испытуемого раствора дистиллированную воду.

3.8.2.4. Обработка результатов

Массовую долю общего азота () в процентах вычисляют по формуле

где - количество 0,025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование контрольной пробы, см;

- количество 0,025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование испытуемой пробы, см;

- поправочный коэффициент к титру 0,025 н. раствора едкого натра;

- количество азота, эквивалентное 1 см 0,025 н. раствора едкого натра, г;

- масса пептона, взятая для получения 5%-ного раствора, г;

- количество препарата, взятое для минерализации, мл;

- количество испытуемого раствора, см.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%.

(Измененная редакция, Изм.

3.9. Определение массовой доли азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.9.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

рН-метр;

стаканы лабораторные по ГОСТ 25336-82 ;

пипетки вместимостью 1, 2 и 20 см по ГОСТ 29169-91 ;

бюретки вместимостью 5 и 10 см с ценой деления 0,05 см по ГОСТ 29252-91 ;

формалин технический по ГОСТ 1625-89 ;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77 , 0,1 н. раствор;

кислоту серную по ГОСТ 4204-77 , 0,1 г.* раствор;

фенолфталеин по НТД, 1%-ный спиртовой раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 .
________________

3.9.2. Подготовка к испытанию

Непосредственно перед работой готовят формольную смесь. Для этого к 50 см формалина добавляют 1 см 1%-ного раствора фенолфталеина и 0,1 г.* раствором гидрата окиси натрия доводят окраску смеси до слабо-розовой.
________________
* Соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

3.9.3. Проведение испытания

К 2 см прозрачного 5%-ного раствора пептона, приготовленного в соответствии с п.3.4.2, приливают 18 см дистиллированной воды и доводят рН смеси до 7,0 потенциометрически 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия или серной кислоты. Затем приливают 2 см формольной смеси и при постоянном перемешивании потенциометрически титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до рН 9,2.

Одновременно ставят контроль на реактивы, для чего вместо 2 см 5%-ного пептона берут 2 см дистиллированной воды.

3.9.4. Обработка результатов

Массовую долю азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов в пептоне () в процентах вычисляют по формуле

где - количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой пробы, см;

- количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование контрольной пробы, см;

- поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия;

- количество азота, эквивалентное 1 см 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, г;

- масса пептона, содержащаяся в 2 см 5%-ного пептона, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%.

(Измененная редакция, Изм. N

3.10. Определение свободного белка

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.10.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

фотоэлектроколориметр;

пипетки вместимостью 5 и 10 см по ГОСТ 29169-91 ;

пробирки стеклянные по ГОСТ 25336-82 ;

кислоту трихлоруксусную 20%-ный раствор.

3.10.2. Проведение испытания

К 5 см фильтрата 5%-ного раствора пептона, приготовленного в соответствии с п.3.4.2, добавляют 5 см 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты и хорошо перемешивают. Через 5 мин определяют оптическую плотность смеси на фотоэлектроколориметре при длине волны 630 нм (красный светофильтр) в кюветах с рабочей длиной 10 мм против того же раствора пептона, разведенного 1:1 дистиллированной водой.

3.10.3. Обработка результатов

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,05%.

3.11. Определение массовой доли хлоридов

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.11.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

элемент нагрева (горелку, плитку);

пипетки вместимостью 1, 2, 10, 20 и 25 см по ГОСТ 29169-91 ;

бюретки вместимостью 25 см с ценой деления 0,05 см по ГОСТ 29252-91 ;

стаканы лабораторные по ГОСТ 25336-82 ;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 ;

серебро азотнокислое по ГОСТ 1277-75 , 0,1 н. раствор;

квасцы железоаммониевые по НТД, насыщенный раствор;

калий роданистый по НТД или аммоний роданистый 0,1 н. раствор;

кислоту азотную по ГОСТ 4461-77 , концентрированную.

(Измененная редакция. Изм. N 2).

3.11.2. Проведение испытания

К 20 мл 1%-ного раствора пептона, приготовленного в соответствии с п.3.4.2, добавляют 30 см дистиллированной воды, 1 мл концентрированной азотной кислоты и 10 см 0,1 н. раствора азотнокислого серебра. Раствор нагревают до начала кипения и быстро охлаждают путем погружения стакана с раствором в сосуд с водой комнатной температуры. После охлаждения смеси добавляют 2 см насыщенного раствора железоаммониевых квасцов (индикатор) и титруют 0,1 н. раствором роданистого калия (или роданистого аммония) до появления кирпично-красного окрашивания.

3.11.3. Обработка результатов

Массовую долю хлоридов () в процентах вычисляют по формуле

где - количество 0,1 н. раствора азотнокислого серебра, взятое в стакан с пробой, см;

- поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора азотнокислого серебра;

- количество 0,1 н. раствора роданистого калия или роданистого аммония, израсходованное на титрование пробы, см;

- поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора роданистого калия или роданистого аммония;

- количество хлоридов (хлор-иона), эквивалентное 1 мл 0,1 н. раствора азотнокислого серебра, г;

- масса пептона, содержащаяся в 20 см 1%-ного раствора, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,1%.

(Измененная редакция, Изм. N

3.12.Определение солей тяжелых металлов

3.12.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г;

элемент нагрева (плитку, горелку);воду дистиллированную по концентрированной серной кислоты и осторожно озоляют сначала на плитке или горелке, а затем в муфельной печи при 500-600 °С до получения однородной золы светло-серого цвета.

После охлаждения тигля золу заливают 1 см насыщенного раствора уксуснокислого аммония и разводят 5 см дистиллированной воды. Содержимое тигля фильтруют в цилиндр через бумажный фильтр. Тигель и фильтр промывают дистиллированной водой, доводя объем раствора в цилиндре до 10 см.

Реакцию фильтрата в цилиндре доводят по лакмусу до нейтральной или слабокислой, добавляя по каплям 10%-ную уксусную кислоту или 10%-ный раствор гидрата окиси натрия. Затем прибавляют 1 см 10%-ной уксусной кислоты, 5 капель насыщенного раствора сернистого натрия и перемешивают. Через 5 мин в растворе не должно быть осадка и желтого окрашивания раствора.

3.13. Определение наличия свободного индола

3.13.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:, 0,1%-ный раствор;

кислоту серную по ГОСТ 4202-75 *, концентрированную.
_________________
* Ссылка на стандарт соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

3.13.2. Проведение испытания

В пробирку с 10 см 1%-ного раствора пептона прибавляют 2 см амилового спирта, закрывают пробирку пробкой, хорошо взбалтывают и прибавляют 1 см 0,1%-ного раствора азотистокислого калия и 1 см концентрированной серной кислоты. Смесь осторожно перемешивают и дают отстояться.

В спиртовом слое не должно появляться розового окрашивания. Появление розового окрашивания спиртового слоя указывает на наличие в пептоне свободного индола.

3.14. Определение способности поддерживать рост микробов

3.14.1. Аппаратура, материалы и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г;

рН-метр;

термостат на 37 °С;

автоклав;

фотоэлектроколориметр;

пробирки по ГОСТ 25336-82 ;

пробки ватно-марлевые;

микропипетки вместимостью 0,2 см;
питательные среды (мясную воду по
Для приготовления МПА к мясной воде добавляют 1% испытуемого пептона, 0,5% хлористого натрия, 2% микробиологического агара и устанавливают рН среды 7,4.

МПБ и МПА фильтруют, разливают по 8 см в пробирки, закрывают ватно-марлевыми пробками и пергаментными колпачками и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПА.

3.14.3. Проведение испытания

Пробирки со стерильными МПБ и косым МПА засевают суточными контрольными культурами. Посев каждой культуры производят микропипеткой по 0,2 см в три пробирки с МПБ и МПА. Инкубацию проводят 24 ч при 37-38 °С.

Типичность роста суточных культур определяют на МПА визуально и под микроскопом. Рост должен быть типичным для каждого штампа* микроорганизмов. Интенсивность роста оценивают в МПБ на фотоэлектроколориметре при длине волны 620-640 нм в кювете с рабочей длиной 5 мм.
________________
* Текст соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

4. ФАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

4.1. Пептон фасуют массой нетто от 250 до 1000 г в жестяные банки по ГОСТ 5981-88 или, по соглашению с потребителем, массой нетто 30 кг в фанерные бочки типа II по НТД прокладкой полиэтиленовой пленки по ГОСТ 10354-82 . Жестяные банки герметически укупоривают.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

4.2. На банку наклеивают этикетку с указанием:

наименования предприятия-изготовителя;

наименования препарата;

номера серии;

массы нетто;

условий хранения;

срока годности;
наименования предприятия-изготовителя и его товарного знака;

наименования препарата;

номера серии;

даты изготовления;

массы брутто и нетто;

условий хранения;

срока годности;

обозначения настоящего стандарта.

На каждый ящик или бочку наносится манипуляционный знак "Боится сырости".

(Измененная редакция, Изм. N 1).

4.5. Пептон хранят в сухом помещении при температуре не выше 30 °С. Срок годности пептона в герметически закрытых банках 3 года, в фанерных бочках - 1 год со дня изготовления.

4.6. Пептон транспортируют всеми видами транспорта с соблюдением правил перевозки грузов, действующих на данном виде транспорта.

Укрепление грузовых мест в транспортные пакеты при перевозке грузов железнодорожным транспортом по ГОСТ 24597-81 и ГОСТ 26663-85 .

(Измененная редакция, Изм. N 1).

Электронный текст документа
подготовлен АО "Кодекс" и сверен по:
официальное издание
М.: ИПК Издательство стандартов, 1995

стр. 1

стр. 2

стр. 3

стр. 4

стр. 5

стр. 6

стр. 7

стр. 8

стр. 9

стр. 10

стр. 11

стр. 12

стр. 13

стр. 14

стр. 15

стр. 16

стр. 17

стр. 18

стр. 19

стр. 20

стр. 21

стр. 22

Цена 5 коп.

Издание официальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ Москва

УДК 547.984.3: 006.354 Группа Н18

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ПЕПТОН СУХОЙ ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ

Технические условия

Dry fermentation pepton for bacteriological obgects. Technical conditions

с 01.01- 1977 г, до 01.01. 1982 г.

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

Таблица 1

Стр. 10 ГОСТ 1380J-76

3.8.2.4. Обработка результатов

V 0,00035(Т- Vi)K- 100-100- ICO * 5== -5^1- ’

где V-количество 0,025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование контрольной пробы, мл;

V t - количество 0,025 н. раствора едкого натра, израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл;

К- поправочный коэффициент к титру 0,025 н. раствора едкого натра;

0,00035-количество азота, эквивалентное 1 мл 0,025 н. раствора едкого натри, г;

5-масса пептона, взятая для получения 5%-ного раствора, г;

5 - количество препарата, взятое для минерализации, мл; 1 -количество испытуемого раствора, мл.

3.9. Определение содержания азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов

3.9.1. Аппаратура и реактивы

РН-метр;

3.9.2. Подготовка к испытанию

3.9.3. Проведение испытания

3.9.4. Обработка результатов

(V- -0.010114. ИЮ

где V-количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл;

V)- количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование контрольной пробы, мл;

К - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия;

0,0014 - количество азота, эквивалентное 1 мл 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, г;

0,1-масса пептона, содержащаяся в 2 мл 5%-ного пептона, г.

3.10. Определение содержания свободного бел-

3.10.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

фотоэлектроколориметр;

пипетки вместимостью 5 и 10 мл;

кислоту трихлоруксусную 20%-ный раствор.

3.10.2. Проведение испытания

3.10.3. Обработка результатов

ГОСТ 13805-76

3.11. О п р е д е л е н и е содержания хлоридов

3.11.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г; элемент нагрева (горелку, плитку); пипетки вместимостью 1, 2, 10, 20 и 25 мл; бюретки вместимостью 25 мл с ценой деления 0,05 мл; стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-72 ; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 ; серебро азотнокислое по ГОСТ 1277-75 , 0,1 н. раствор; квасцы железоаммониевые по ГОСТ 4205-77 , насыщенный раствор;

3.12. Определение солей тяжелых металлов

3.12.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г; элемент нагрева (плитку, горелку); печь муфельную;

пипетки вместимостью 1, 2 и 10 мл;

пробки резиновые конусные по ГОСТ 7852-76 ;

ГОСТ 13 *05-76

спирт амиловый;

3.14.2. Подготовка к испытанию

3.14.3. Проведение испытания

ГОСТ 13S05-76 Стр. 15

Инкубацию проводят 24 ч при 37-38°С.

Типичность роста суточйых культур определяют на МПА визуально и под микроскопом. Рост должен быть типичным для каждого штампа микроорганизмов. Интенсивность роста оценивают в МПБ на фотоэлектроколориметре при длине волны 620-640 нм в кювете с рабочей длиной 5 мм.

4. ФАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

4.1. Пептон фасуют массой нетто от 250 до 1000 г в жестяные банки по ГОСТ 5981-71 или, по соглашению с потребителем, массой нетто 30 кг в фанерные бочки по ГОСТ 5958-79 с прокладкой полиэтиленовой пленки по ГОСТ 10354-73 . Жестяные банки герметически укупоривают.

4.2. На банку наклеивают этикетку с указанием: наименования предприятия- изготовителя; наименования препарата;

номера серии; массы нетто; условий хранения; срока годности;

4.4. Каждый ящик и бочку маркируют по ГОСТ 14192-77 с указанием дополнительных данных:

наименования препарата;

номера серии;

даты изготовления;

массы брутто и нетто;

условий хранения;

срока годности;

обозначения настоящего стандарта.

На каждый ящик или бочку наносится предупредительный знак «Боится сырости».

4.6. Пептон транспортируют всеми видами транспорта.

Пункты 3.6.1, 3.8.1.1, 3.8.2.1, 3.9.1, 3.12.1. Заменить ссылку: ГОСТ 4204-66 на ГОСТ 4204_77.

Пункты 3.7.1, 3.8.1.1, 3.8.2.1, 3.9.1, 3.10.3, 3.11.1, 3.13.1, 3.14.1 в части пипеток и бюреток дополнить ссылкой: «по ГОСТ 20292-74 ».

Пункт 3.7.1, Заменить слова и ссылку: «воронки стеклянные» на «воронки стеклянные по ГОСТ 8613-75 »; ГОСТ 4165-68 на ГОСТ 4165-78 .

(Продолжение см. стр. 170J

Пункт 4.1 после слов «фанерные бочки» дополнить словами: «типа II»; заменить ссылку: ГОСТ 5958-70 на ГОСТ 5958-79 .

Пункт 4.4. Заменить слова: «Каждый ящик и бочку маркируют по ГОСТ 14192-71 с указанием дополнительных данных» на «Транспортная маркировка по ГОСТ 14192-77 с указанием дополнительных данных»; «наименования пред* приятия-изготовителя» на «наименования предприятия-изготовителя и его то« варного знака»; «предупредительный» на «манипуляционный».

Пункт 4.6 дополнить словами: «с соблюдением правил перевозки грузов, действующих на данном виде транспорта.

(ИУС № 3 1982 г.)

Пункт 3.7.1 изложить в новой редакции:

(Продолжение см. с. 290) (Продолжение изменения к ГОСТ 13805-76 >

«3.7.1, Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

фотоэлектроколориметр или спектрофотометр;

центрифуги настольные типа ОПн-6-У4,2,

пипетки вместимостью 1 и 5 см 3 по ГОСТ 20292-74 ;

3.1.2. На банки с пробами ферментативного пептона наклеивают этикетки с указанием:

наименования предприятия-изготовителя;

наименования препарата;

даты изготовления;

номера серии;

даты взятия пробы;

обозначение настоящего стандарта.

Две пробы используют для анализа, а две - оставляют в архиве государственного контролера в течение 4 лет.

3.2. Внешний вид, цвет и запах пептона определяют органолептически.

3.3. Определение концентрации водородных ионов (pH)

3.3.1. Аппаратура и реактивы

весы лабораторные;

ГОСТ 1770-74 ;

фильтры бумажные;

3.3.2. Проведение испытания

Навеску пептона массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0,02 г, помещают в колбу и растворяют в 99 мл прокипяченной и охлажденной дистиллированной воды. В растворе допускается незначительный осадок, который отфильтровывают через бумажный фильтр. В прозрачном фильтрате 1%-ного раствора пептона определяют концентрацию водородных ионов (PH) в соответствии с правилами, прилагаемыми к рН-метру.

3.4. Определение содержания нерастворимых примесей

3.4.1. Аппаратура, материалы и реактивы шкаф сушильный на 105°С;

ГОСТ 7148-70 ; эксикатор по ГОСТ 6371-73 ;

цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770-74 ;

фильтры бумажные;

3.4.2. Проведение испытания

После кипячения 1 % -ный раствор пептона разливают в пробирки по 7-8 мл, закрывают ватными пробками и выдерживают в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПа. Раствор должен остаться прозрачным, без образования осадка.

3.4.3. Обработка результатов

_ (/722-П1\) * lllClfO

где m- масса пептона, взятая для приготовления 100 г 5%-ного раствора пептона, г; mi - масса бюксы с фильтром до фильтрования, г; т 2 - масса бюксы и фильтра с осадком после высушивания, г.

3.5. О пределение содержания влаги 3.5.1. Аппаратура

Для проведения испытания применяют: весы аналитические;

шкаф сушильный лабораторный на 105°С;

стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70 ;

3.5.2. Проведение испытания

3.5.3. Обработка результатов

у (т-!П\) * 1|0Ю

где m - масса навески пептона до высушивания, г; гп\ - масса навески пептона после высушивания, г.

3.6. Определение содержания сульфированной золы

3.6.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют:

весы аналитические;

элемент нагрева (плитку, горелку);

печь муфельную;

3.7. О п р е д е л е н и е содержания истинного пептона

3.7.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют: фотоэлектроколориметр или спектрофотометр; пипетки вместимостью 1 и 5 мл; пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-75 ; воронки стеклянные; фильтры бумажные:

3.7.2. Подготовка к испытанию Построение градуировочного графика

По оса абсцисс откладывают концентрацию истинного пептона в растворе, по оси ординат - величину оптической плотности (Е) этого раствора согласно данным, приведенным в табл. 2. Приведенные в табл. 2 величины оптической плотности (Е) получены измерением на фотоэлектроколориметре при длине волны 540 нм растворов специально приготовленной серии пептона, содержащей минимум свободного белка и аминокислот и максимум пептидов.

Таблица 2

Концентрация истинного пептона в растворе, %

Оптическая плотность (£) раствора

0,560 0Я80 0,190

3.7.3. Проведение испытания

0,5 мл 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 0,5 мл 2%-ного раствора сернокислой меди.

3.7.4. Обработка результатов

у _ А-11Ю0 Аз 0,5

0,5-масса пептона (препарата), содержащаяся в 100 г 0,5%-ного раствора, г.

3.8.1. Определение содержания общего азота методом Къельдаля

3.8.1.1. Аппаратура и реактивы

Для проведения испытания применяют: весы аналитические;

колбы Къельдаля вместимостью 50-100 мл по ГОСТ

аппарат для отгонки аммиака; пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл;

бюретки вместимостью 25 или 50 мл с ценой деления 0,05 мл; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72 ; кислоту серную по ГОСТ 4204-77 , концентрированную и 0,1 н. раствор;

ГОСТ 13805-76

3.8.2.2. Подготовка к испытанию Приготовление индикатора Таширо по п. 3.8.1.2.

3.8.2.3. Проведение испытания

ГОСТ 13805-76*

Группа H18

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ПЕПТОН СУХОЙ ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ

Технические условия

Dry fermentation peptone for bacteriological purposes.
Specifications

Дата введения 1977-01-01

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

Таблица 1


Наименование показателя	Характеристика и норма
Внешний вид	Аморфный однородный порошок
	От белого до желтого
	Характерный, без гнилостного
Концентрация водородных ионов (рН)
Массовая доля нерастворимых примесей, %, не более
Массовая доля влаги, %, не более
Массовая доля сульфированной золы, %, не более
Массовая доля истинного пептона, %, не менее
Массовая доля общего азота, %, не менее
Массовая доля азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов, %, не менее
Наличие свободного белка, оптическая плотность, не более
Массовая доля хлоридов в пересчете на хлор-ион, %, не более
Наличие солей тяжелых металлов	Не допускается
Наличие свободного индола
Способность поддерживать рост микробов, оптическая плотность, не менее	Рост типичный
Staphylococcus aereus "Лассманов"
Escherichia coli штамм 675
Streptococcus faecalis штамм 6783

2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ

2.3. Выборку составляют из банок, взятых из разных мест серии.

2.2-2.4.

3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

3.1. Метод отбора проб

3.2. Внешний вид, цвет и запах пептона определяют органолептически.

3.3. Определение концентрации водородных ионов (рН)

3.4. Определение массовой доли нерастворимых примесей

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.4.3. Обработка результатов

Массовую долю нерастворимых примесей () в процентах вычисляют по формуле

3.5. Определение массовой доли влаги

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.5.3. Обработка результатов

Массовую долю влаги () в процентах вычисляют по формуле

3.6. Определение массовой доли сульфированной золы

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.6.3. Обработка результатов

Массовую долю сульфированной золы () в процентах вычисляют по формуле

3.7. Определение массовой доли истинного пептона

Таблица 2


Концентрация истинного пептона в растворе, %	Оптическая плотность () раствора

3.7.4. Обработка результатов

Массовую долю истинного пептона () в процентах вычисляют по формуле

3.8.1. Определение массовой доли общего азота методом Къельдаля

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.8.1.3. Обработка результатов

3.8.2.2. Подготовка к испытанию

Приготовление индикатора Таширо по п.3.8.1.2.

3.8.2.3. Проведение испытания

3.8.2.4. Обработка результатов

Массовую долю общего азота () в процентах вычисляют по формуле

3.9. Определение массовой доли азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.10. Определение свободного белка

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.11. Определение массовой доли хлоридов

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.11.3. Обработка результатов

Массовую долю хлоридов () в процентах вычисляют по формуле

3.12.Определение солей тяжелых металлов

3.13. Определение наличия свободного индола

3.14. Определение способности поддерживать рост микробов

4. ФАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

4.5. Пептон хранят в сухом помещении при температуре не выше 30 °С. Срок годности пептона в герметически закрытых банках 3 года, в фанерных бочках - 1 год со дня изготовления.

Пептон ферментативный регистрационное удостоверение. Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей

Читайте также

ГОСТ 13805-76

о,дао

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ

3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

4. ФАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ

3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

4. ФАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ